萊恩德大腸肝菌檢測(cè)儀檢測(cè)大腸菌群的方法步驟
作者：admin 發(fā)布時(shí)間：2021-07-14 01:49:38 瀏覽次數(shù) :677
萊恩德大腸肝菌檢測(cè)儀檢測(cè)大腸菌群的方法步驟：
1、適用范圍：適用于各類(lèi)食品、原料和純凈水等樣品中大腸菌群的快速檢測(cè)。
2、檢測(cè)原理：將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上，經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長(zhǎng)并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽(yáng)性，記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。
3、分析特點(diǎn)：與國(guó)標(biāo)法中的九管法相對(duì)應(yīng)，將原來(lái)幾步的試驗(yàn)簡(jiǎn)化為一步，時(shí)間由78h縮短為24h以?xún)?nèi)，省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時(shí)可以打開(kāi)包裝進(jìn)行抽樣檢測(cè)。
4、方法步驟
（1）樣品處理：無(wú)菌稱(chēng)取樣品25g（或25mL）放入含有225mL滅菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯中，經(jīng)充分振搖做成1：10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖試管制成1：100的稀釋液。以此類(lèi)推，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。
（2）接種：選取兩個(gè)稀釋度進(jìn)行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個(gè)稀釋度，飲料和飲用水采用原液和1：10兩個(gè)稀釋度。每份由三片大紙片（接10mL）,六片小紙片（接1mL）組成,大片每小袋二張疊放算作一片。用滅菌吸管吸取10 mL 1：10稀釋液加到含有大紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品1g），吸透后平放，做三個(gè)重復(fù)。再用1mL滅菌吸管吸取1 mL同一稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品0.1g），做三個(gè)重復(fù)。再取一支1 mL滅菌吸管吸取1 mL 1：100稀釋液涂布到含有小紙片的塑料袋中（相當(dāng)于接樣品0.01g），做三個(gè)重復(fù)。
（3）培養(yǎng)：將接種好的紙片（可疊放）放入37°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15h～24h。
5、結(jié)果判斷與計(jì)數(shù)：若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽(yáng)性紙片。紙片保持紫蘭色不變或在紫蘭色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)，但周?chē)鷽](méi)有黃色均為大腸菌群陰性紙片。記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù)，根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。如接種的第一個(gè)稀釋度的稀釋液為原液，應(yīng)將表上查出的結(jié)果除以10，以此類(lèi)推。
6、注意事項(xiàng)：如果樣品的酸堿度在pH7以下，應(yīng)先用滅菌1mol/L氫氧化鈉（NaOH）調(diào)節(jié)溶液調(diào)至中性，避免因pH的原因?qū)е碌募埰凕S而影響結(jié)果觀察。
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